【摘 要】
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目的 探究哺乳动物细胞中高尔基体磷酸化蛋白3（GOLPH3）通过mTORC1信号通路调控溶酶体发生的分子机制。方法 利用CRISPR Cas9建立GOLPH3敲除稳定细胞株。通过Western blot分析比较对照细胞与GOLPH3敲除细胞的mTORC1活性、TFEB（转录因子EB）以及pTEFB水平，进一步用免疫荧光方法标记溶酶体联系膜蛋白LAMP1,比较两种细胞中溶酶体数量的差别。结果 细胞中
【机 构】
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安徽医科大学生命科学学院细胞生物学系
【基金项目】
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国家自然科学基金重大研究计划培育项目（编号：91854120）；
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目的 探究哺乳动物细胞中高尔基体磷酸化蛋白3（GOLPH3）通过mTORC1信号通路调控溶酶体发生的分子机制。方法 利用CRISPR Cas9建立GOLPH3敲除稳定细胞株。通过Western blot分析比较对照细胞与GOLPH3敲除细胞的mTORC1活性、TFEB（转录因子EB）以及pTEFB水平，进一步用免疫荧光方法标记溶酶体联系膜蛋白LAMP1,比较两种细胞中溶酶体数量的差别。结果 细胞中敲除GOLPH3将显著抑制mTORC1活性，减少细胞质中pTEFB水平，增加活化TFEB的细胞核定位，促进溶酶体的生物发生。结论 高尔基体蛋白GOLPH3通过mTORC1信号通路调控溶酶体发生。
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