基于CRISPR/Cas9技术研究金针菇冷诱导结实基因HK1和HK2的编辑转化系统

来源 :食用菌学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：youyoucao_1

【摘要】

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对金针菇(Flammulina velutipes)冷诱导相关的组氨酸激酶基因HK1和HK 2构建了基因组编辑(CRISPR/Cas9)pgfvs-Cas9-HK1-gRNA和pgfvs-Cas9-HK2-gRNA表达载体,探索了金针菇菌丝

【作者】

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欧阳萍兰李琼洁郭丽琼林俊芳叶志伟魏韬郑倩望伍土

【机构】

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华南农业大学食品学院&,食品生物技术研究所,广东省微生态制剂工程技术研究中心

【出处】

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食用菌学报

【发表日期】

：

2018年3期

【关键词】

：

金针菇 CRISPR/Cas9 PEG介导的转化 Flammulina velutipesCRISPR/Cas9PEG mediated transformat

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目(31372116、31572178)和广东省现代农业食用菌体系项目(2016LM1125、2016LM1126)

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对金针菇(Flammulina velutipes)冷诱导相关的组氨酸激酶基因HK1和HK 2构建了基因组编辑(CRISPR/Cas9)pgfvs-Cas9-HK1-gRNA和pgfvs-Cas9-HK2-gRNA表达载体,探索了金针菇菌丝体及原生质体对潮霉素的最低敏感浓度,利用PEG介导的方法将表达载体pgfvs-Cas9-HK1/HK2-gRNA转化金针菇原生质体,经潮霉素筛选后的拟转化子再进行PCR鉴定。结果显示:金针菇菌丝体及原生质体对潮霉素的最低敏感浓度均为50μg/mL;经潮霉素筛选后的部分拟

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