【摘 要】
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目的 探讨胰腺的冷保存时间对胰岛的获得量、活性、纯度及功能的影响.方法 采用Wistar大鼠,切取其胰腺,然后保存于4℃UW液中,分别于保存3 h(3 h组)、6 h(6 h组)、9h(9 h组)、
【机 构】
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中网医科大学附属第一医院普通外科教研室器官移植科
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目的 探讨胰腺的冷保存时间对胰岛的获得量、活性、纯度及功能的影响.方法 采用Wistar大鼠,切取其胰腺,然后保存于4℃UW液中,分别于保存3 h(3 h组)、6 h(6 h组)、9h(9 h组)、12 h(12 h组)、15 h(15 h组)、18 h(18 h组)和21 h(21 h组)取出胰腺,采用明尼苏达大学改良方法分离、纯化胰岛,并设不经过冷保存的对照组.分离、纯化所得的胰岛以双硫腙染色,分析胰岛数量与纯度;丫啶橙/溴化乙啶染色分析胰岛活性;测定胰岛在葡萄糖刺激下的胰岛素分泌量.结果 对照组每个大鼠胰腺平均叮获得560当量胰岛,形态完整.纯度达到88%,活性达到94%.3 h组和6 h组的胰岛获得量略有下降,但与对照组相比,差异无统计学意义.9 h组、12 h组、15 h组、18 h组和21 h组的胰岛获得量较对照组、3 h组和6 h组明显下降(P＜0.01,P＜0.05),各组间相比较,差异也有统计学意义(P＜0.01),且随保存时间的延长,各组的胰岛活性和纯度也逐渐下降.9 h组、12 h组和15 h组胰岛细胞形态基本完整,但可见少数细胞被膜不完整,内分泌颗粒外溢.18 h组和21 h组胰岛形态不规则,被膜破裂,大量内分泌颗粒外溢.对照组、3 h组和6 h组对高糖刺激反应良好,三者问的胰岛素释放指数(SI)的差异无统计学意义,保存9 h以后,各组SI均较对照组、3 h组和6 h组明显下降(P＜0.01,P＜0.05),且各组间的差异也有统计学意义(P＜0.01),18 h组和21 h组尤其明显.结论 采用UW液低温保存大鼠胰腺6 h以内,获得的胰岛的数量较多,质量较好;保存6～15 h,获得的胰岛数量及质量有所下降,但仍然可以用于移植;保存时间超过15 h,获得的胰岛数量及质量明显下降,不宜用于移植.
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