【摘 要】
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目的 观察姜黄素对过氧化氢(H2O2)诱导少突胶质细胞(OL)前体细胞损伤作用的保护作用,并探讨其作用机制.方法 (1)体外原代培养OL前体细胞并加入0、100、250、500μmol/L H2O2
【机 构】
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深圳市儿童医院新生儿科,上海交通大学医学院附属新华医院儿科
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目的 观察姜黄素对过氧化氢(H2O2)诱导少突胶质细胞(OL)前体细胞损伤作用的保护作用,并探讨其作用机制.方法 (1)体外原代培养OL前体细胞并加入0、100、250、500μmol/L H2O2作用30 min,Hoechst33342/PI双染观察细胞凋亡和死亡情况;(2)将细胞分为正常对照组、模型组及5、10、20 μmol/L姜黄素组,后3组细胞分别加入5、10、20 μmol/L姜黄素孵育1h,后4组细胞均加入100 μmol/L H2O2作用30 min后,MTT法检测各组细胞存活率;(3)将细胞分为正常对照组、模型组及10 μmol/L姜黄素组,进行相应处理后用流式细胞术检测细胞凋亡,分光光度法测定氧化/抗氧化物质含量,Western blotting法检测B细胞淋巴瘤基因-2、Bcl-2相关X蛋白和半胱天冬蛋白酶(caspase)-3、caspase-9蛋白的表达.结果 (1)与正常对照组比较,100、250、500μmol/L H2O2组正常细胞减少,凋亡和坏死细胞均增多,差异有统计学意义(P＜0.05).100μmol/LH2O2组凋亡细胞多于坏死细胞,250、500 μmol/LH2O2组坏死细胞多于凋亡细胞;(2)MTT检测显示5、10和20 μmol/L姜黄素组细胞存活率高于模型组,且10和20μmol/L姜黄素组高于5μmol/L姜黄素组,差异均有统计学意义(P＜0.05);(3)与模型组比较,10 μmol/L姜黄素组凋亡和坏死细胞明显减少,且细胞总超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶的活性增加,谷胱甘肽含量升高、丙二醛含量降低,Bcl-2表达升高、Bax、caspase-3、9的表达降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 姜黄素对氧化应激损伤的OL前体细胞具有保护作用,其机制可能与减轻OL前体的脂质过氧化、调节Bcl-2/Bax的表达以及抑制caspase-3、9的活化有关.
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