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采用两步ＰＣＲ法成功地克隆了一个全长的ｃＤＮＡ。首先，用差式分析法克隆得到差别表达的ｃＤＮＡ片段，再分别用这些片段内部的特异序列及ｃＤＮＡ两端不同接头的序列为引物进行第一步ＰＣＲ扩增，得到差别ｃＤＮＡ片段的上游和下游序列。然后，根据第一步ＰＣＲ扩增得到的上游和下游序列设计基因特异的引物进行第二步ＰＣＲ，从而得到全长的ｃＤＮＡ。