【摘 要】
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目的:探讨玻璃酸钠(HA)对白细胞介素1β(IL-1β)诱导的软骨细胞损伤的影响及作用机制.方法:取人软骨细胞第3代对数生长期的细胞进行试验.部分软骨细胞分别转染miR-92a-3p抑制剂(inhibitor)、miR-92a-3p模拟物(mimics)和相应对照(inhibitor-NC、mimics-NC)至48 h后,将细胞分为Control组(用PBS处理未经转染的细胞24 h)、IL-1β组(用0.1μL10 ng/ml的IL-1β诱导未经转染的细胞24 h)、IL-1βmimics-NC组和I
【机 构】
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福建医科大学附属第二医院骨科 福建泉州 362000
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目的:探讨玻璃酸钠(HA)对白细胞介素1β(IL-1β)诱导的软骨细胞损伤的影响及作用机制.方法:取人软骨细胞第3代对数生长期的细胞进行试验.部分软骨细胞分别转染miR-92a-3p抑制剂(inhibitor)、miR-92a-3p模拟物(mimics)和相应对照(inhibitor-NC、mimics-NC)至48 h后,将细胞分为Control组(用PBS处理未经转染的细胞24 h)、IL-1β组(用0.1μL10 ng/ml的IL-1β诱导未经转染的细胞24 h)、IL-1βmimics-NC组和IL-1βmiR-92a-3p mimics组(用0.1μL10 ng/ml的IL-1β分别诱导经mimics-NC、miR-92a-3pmimics转染的细胞24 h)、IL-1β+HA组(用0.1μL 10 ng/ml的IL-1β诱导未经转染的细胞24 h后,加入0.1μL 100μg/ml HA培养24 h)、IL-1β+HA inhibitor-NC组和IL-1β+HA miR-92a-3p inhibitor组(用0.1μL 10 ng/ml的IL-1β分别诱导经inhibitor-NC、miR-92a-3p inhibitor转染的细胞24 h后,分别加入0.1μL 100μg/ml HA培养24 h).用实时荧光定量PCR检测各组细胞中miR-92a-3p的表达,用四甲基偶氮唑盐法(MTT)法检测细胞活性,用流式细胞仪检测细胞凋亡,用Western Blot法检测基质金属蛋白酶3(MMP-3),基质金属蛋白酶13(MMP-13)、和Ⅱ型胶原纤维α1基因(COL2A1)蛋白水平的表达.结果:与Control相比,miR-92a-3p在IL-1β组中表达显著降低(P<0.01).当转染miR-92a-3p mimics后,IL-1β诱导的软骨细胞miR-92a-3p表达升高、细胞活力增加、凋亡率降低、细胞中MMP-3及MMP-13蛋白水平降低、COL2A1蛋白水平升高(P<0.01).HA可增加IL-1β诱导的软骨细胞中miR-92a-3p的表达、增加细胞活性、降低细胞凋亡率、降低细胞中MMP-3和MMP-13、升高COL2A1蛋白水平(P<0.05,P<0.01).结论:HA可通过增加miR-92a-3p表达抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡,增加细胞活性,保护IL-1β诱导的软骨细胞损伤.
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