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用SalI和EcoRI酶将CBF4基因切下,连接到Bluescript M13(SK)上,构建成中间载体SK-CBF4,再用BamHI和KpnI双酶切SK-CBF4和HpBPC26-CBF4,用T4DNA连接酶将这2个片段连到一起,构建成植物表达载体HpBPC-CBF4。PCR和酶切鉴定结果表明植物表达载体HpBPC26-CBF4构建正确,可用于今后单子叶植物遗传转化。