【摘 要】
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目的：构建抑制Smad3的shRNA表达载体。方法：化学合成2段编码短发夹RNA序列的、靶向Smad3的寡核苷酸,各64个碱基,退火,克隆到经BgLⅡ和HindⅢ双酶切同时经牛小肠碱性磷酸酶（alkal
【机 构】
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中南大学湘雅二医院肾内科,中南大学湘雅二医院急诊科
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目的：构建抑制Smad3的shRNA表达载体。方法：化学合成2段编码短发夹RNA序列的、靶向Smad3的寡核苷酸,各64个碱基,退火,克隆到经BgLⅡ和HindⅢ双酶切同时经牛小肠碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,CIP）处理后的pSUPER载体的polyⅢH1启动子的下游,重组构建RNA干扰（RNA induced interference,RNAi）质粒,同时设立错义寡核苷酸作为非特异性对照。并将所构建的pSUPER Smad3转染到人类肾小管上皮细胞（human renal tu
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