【摘 要】
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目的 观察甲磺酸盐及紫外线敏感性81号基因(Mus81)沉默对结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响并探讨其调控机制.方法 采用慢病毒介导的小干扰RNA (siRNA)技术靶向沉默Mus81基因
【机 构】
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510220,广州市红十字会医院暨南大学医学院附属广州红十字会医院普通外科
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目的 观察甲磺酸盐及紫外线敏感性81号基因(Mus81)沉默对结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响并探讨其调控机制.方法 采用慢病毒介导的小干扰RNA (siRNA)技术靶向沉默Mus81基因的表达,以实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot检测Mus81基因的表达抑制率.采用噻唑蓝(MTT)法绘制细胞生长曲线,以碘化丙锭(PI)及膜联蛋白V(Annexin V)-APC染色法检测细胞周期及凋亡率,以Real-time PCR法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)及p53基因的表达.结果 Mus81基因和蛋白的抑制率分别为84.64％和71.03％ (P＜0.01).Mus81沉默后HCT116细胞的增殖速度明显降低(P＜0.01),凋亡率明显升高[(19.69±0.20)％比(8.74±0.11)％,P＜0.01],G2/M期细胞比例轻微上升[(12.99±0.48)％比(11.69±0.41)％,P＜0.05],其bax和p53的表达分别升高了71.73％和12.02％ (P ＜0.05),bcl-2表达则降低了37.72％ (P ＜0.01).结论 Mus81基因沉默可明显促进HCT116细胞凋亡并抑制其增殖,其机制可能与调控bax、bcl-2及p53基因的表达有关.
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