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用Balb/c雄小鼠的脾细胞和皮肤组织对同系雌小鼠脾脏作一次直接免疫和5次腹腔加强免疫,雌小鼠产生良好的免疫应答。其抗血清用未经免疫的雌小鼠脾细胞吸收后,经细胞毒性法检测,H-Y抗血清的效价可达1:1024;选择免疫应答最好的2只雌小鼠,取其脾细胞与NS-1骨髓瘤细胞进行融合,融合率100%,经3次有限稀释克隆后,取4只阳性最强的杂交瘤细胞制备腹水。取其中一株的腹水采用胚胎细胞毒法进行特异性鉴定,结果其对20个正常胚胎中的7个有杀伤溶解现象。4株细胞系分泌的抗体(腹水)以精子细胞毒法测定其效价分别为1:5