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黄曲霉毒素(Aflatoxin, AFT)是一类由黄曲霉(Aspergillus flavus)和寄生曲霉(Aspergillus parasiticus)等真菌在一定条件下产生的次级代谢产物,其中以黄曲霉毒素B1的毒性最强,具有致癌、致畸、致突变作用,被国际癌症研究机构赋予“一级致癌物质”称号。AFT污染是影响花生及其制品消费安全和出口贸易的主要原因,寻找一种快速检测技术和去毒方法有较强的实际应用价值。本课题的研究对象为花生油中的黄曲霉毒素B1,寻求建立一种酶联免疫快速检测技术,同时比较用60Co辐照和微波辐照手段对黄曲霉毒素B1的去毒效果,并对处理后的花生油的主要理化指标和降解产物的安全性进行评价。影响AFB1-O合成主要影响因子的单因素实验和正交试验结果表明：在起始质量比匕AFB1/CMO=1:2、反应时间5h、反应温度65℃条件下肟化率最高可达96.7%；影响肟化率的强弱因素依次为：AFB1/CMO起始质量比>反应时间>反应温度。AFB1-BSA(即完全抗原)的最佳合成条件为：AFB1-O/BSA起始摩尔比为30：1,23℃振摇避光反应20h。AFB1-OVA(即包被抗)原最佳合成条件为：交联剂起始摩尔比EDC/NHS=4:1,23℃避光反应12h。用人工合成抗原免疫小鼠而得到抗体,测定多抗血清效价为1：3200;半抑制浓度为/C50=3.25ng/mL;与AFM1的交叉反应率为3.1%,玉米赤酶烯酮、呕吐毒素的交叉反应率均小于0.28%。将得到的抗体适当稀释,用棋盘滴定法测得最适工作浓度为：抗体稀释13000和酶标抗原稀释16000倍。由实验得出黄曲霉毒素B1酶联免疫试剂盒最佳工作条件参数为：抗体包被时间为4℃下包被12h,明胶封闭时间为4℃下封闭12h,抗原抗体特异性反应温育时间为避光反应30min,显色时间为室温下反应10min。加速破坏性实验证明：该试剂盒在4℃条件下至少可以保存30天,ELISA试剂盒与HPLC检测结果相比无显著性差异。样品前处理方法简单有效,经有机溶剂提取,测定结果与国标法相近。黄曲霉毒素B1的降解实验结果证明：随60Co辐照剂量的增大,降解率随之增加；当AFBt的初始含量小于25ppb时,10kGy的辐照剂量可以完全去除花生油中AFB1。微波辐照降解经单因素实验和响应面实验结果可知：各因素对AFB1降解率影响程度依次为：微波作用时间>微波功率>AFB1初始含量,三因素都达到了极显著水平。根据响应面实验分析得出降解AFB1最佳条件参数为：AFB1初始含量为13.72ppb、微波功率803.98W、微波作用时间10.27min,得到AFB1降解率的的预测值为96.0055%。在微波降解AFB1最佳处理条件下,检测花生油主要理化指标酸值、碘值、过氧化值、维生素E和反式脂肪酸均未发生显著变化,符合国家相关标准。经Ames实验可知：添加S9代谢活化系统的阳性对照组(即未降解的AFB1)菌落回复突变数与AFB1剂量间存在显著的剂量-反应关系；而阳性对照组(即未降解的AFB1)只有在加入S9代谢活化系统时,菌落回复突变数与自发回复突变组相比,除5ng剂量组外,差异达到显著(a<0.01)或极显著(b<0.01)。无论是否添加S9代谢活化系统,阳性组(即AFB1微波降解产物)在不同剂量下诱发的菌落回复突变数与自发回复突变组相比,无显著差异(p>0.05)。说明微波辐照降解花生油中AFB1所产生的降解产物毒性完全消失。由此可知：AFB1经微波降解后,其降解产物对TA98、TA100和TA102菌株均不呈现剂量-反应关系,说明微波辐照AFB1的降解产物对组氨酸营养缺陷性鼠伤沙门氏菌无致突变性。