低氧特异性重组腺相关病毒VEGF_(165)的构建与表达

来源 :中国微侵袭神经外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jingfei1415
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目的构建VEGF165 低氧启动rAAV载体,用于缺血性脑血管病的治疗。方法通过分子生物学的方法,构建VEGF165 低氧启动rAAV载体,采用磷酸钙和氯仿-PEG8000/NaCl-氯仿法构建低氧启动rAAV病毒。通过体内外低氧诱导,验证VEGF165 低氧启动rAAV对低氧的特异性。结果体内外实验证实,VEGF165 低氧启动rAAV仅在低氧诱导后表达具有生物活性的VEGF蛋白,对低氧具有特异性。结论VEGF165 低氧启动rAAV构建成功,可望用于缺血性疾病的基因治疗。 Objective To construct VEGF165 hypoxia-activated rAAV vector for the treatment of ischemic cerebrovascular disease. Methods The rAAV vector containing VEGF165 promoter was constructed by molecular biology. The hypoxia-inactivated rAAV virus was constructed by using calcium phosphate and PEG-8000 / NaCl-chloroform method. Hypoxia was activated by VEGF165 hypoxia in vitro and in vivo. Results In vivo and in vitro experiments showed that VEGF165 hypoxia-activated rAAV expressed biologically active VEGF protein only after hypoxia induction, which is specific to hypoxia. Conclusion VEGF165 hypoxia-activated rAAV is successfully constructed and is expected to be used in the gene therapy of ischemic diseases.
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