人B7.1真核表达载体的构建、鉴定及其在白血病细胞上表达的实验研究

来源 :中国实验血液学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hongniba3493
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本研究构建包含人B7.1cDNA的重组真核表达载体pDisplay-hB7.1并鉴定,实现其在白血病细胞株HL-60细胞上的表达,获得HL60-hB7.1。应用分子克隆、PCR法扩增人B7.1基因片段,采用ApaⅠ、Sall分别双酶切PCR产物和表达载体pHook,纯化后的酶切产物由T4DNA连接酶连接,转导大肠杆菌DI-15et;应用ApaⅠ、SalⅠ双酶切和DNA序列分析技术进一步鉴定阳性克隆pDisplay-hB7.1,应用脂质体转化技术将B7.1转染HL-60细胞,同一标本分别采用直接免疫荧光法、
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