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目的:本文对成骨不全患者骨骼中胶原蛋白的提取方法进行探讨,拟建立较为稳定的和可控的提取技术。为该病的治疗寻找新思路。方法:选取成骨不全患者在接受外科矫形手术中废弃的骨骼组织,经原代细胞培养后,采用盐析法配合胃蛋白酶消化提取细胞内和培养液中胶原蛋白。分别选取0.05~0.2mM抗坏血酸、0.1~0.25mMβ-氨基丙腈(BAPN)、0.5-1.5mg/mL胃蛋白酶进行梯度实验,比较胶原蛋白提取效果。抗坏血酸作用时间2到5天,每间隔24小时取样一次。胃蛋白酶作用时间,分别为5小时、10小时和20小时三个时间点