幽门螺杆菌外膜蛋白cagL基因的克隆、表达及其对IL-8 mRNA表达的影响

来源 :江苏大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaoyueban
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目的:克隆表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)NCTC11637菌株cagL基因,并探讨其对IL-8mRNA表达的影响。方法:设计cagL引物,应用PCR扩增目的基因片段,TA克隆后测序分析,用信息学软件分析其物理化学特性,并构建表达载体cagL-PET28 a(+)转化E.coliBL-21(DE3),IPTG诱导表达,镍亲和层析纯化,SDS-PAGE及蛋白质印迹鉴定表达蛋白。纯化蛋白与细胞GES-1共培养,提取细胞总RNA,RT-PCR检测细胞IL-8mRNA表达
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