【摘 要】
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目的：探讨miR-431-3p对胃癌细胞增殖和凋亡的影响，阐明其可能的分子机制。方法：取经病理诊断确诊为胃癌的68例患者的胃癌组织及其癌旁组织。采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测胃癌组织、癌旁组织和人正常胃黏膜上皮GES-1细胞、人胃癌细胞（MKN-28、MGC-803、 MKN-45、 SGC-7901和HGC-27）中miR-431-3p及羧基末端结构域磷酸酶1 （CTDP1）mR
【机 构】
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南华大学衡阳医学院附属第二医院血液肿瘤内科
【基金项目】
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湖南省卫计委科研项目（202103032022）； 湖南省衡阳市科技局指导性项目（2020jh042698）；
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目的：探讨miR-431-3p对胃癌细胞增殖和凋亡的影响，阐明其可能的分子机制。方法：取经病理诊断确诊为胃癌的68例患者的胃癌组织及其癌旁组织。采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测胃癌组织、癌旁组织和人正常胃黏膜上皮GES-1细胞、人胃癌细胞（MKN-28、MGC-803、 MKN-45、 SGC-7901和HGC-27）中miR-431-3p及羧基末端结构域磷酸酶1 （CTDP1）mRNA表达水平，Western blotting法检测上述细胞中CTDP1蛋白和各组SGC-7901细胞中细胞色素C（Cyt C）、B细胞淋巴瘤2 （Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白表达水平。采用Pearson相关分析法分析miR-431-3p与CTDP1 mRNA表达水平的相关性，双荧光素酶报告基因实验检测miR-431-3p和CTDP1的靶向关系。将miR-431-3p mimic和CTDP1过表达慢病毒分别或同时转染至SGC-7901细胞中，将细胞分为空白组、空载过表达（mimic NC）组、miR-431-3p过表达（miR-431-3p mimic）组、空载慢病毒（Vector）组、CTDP1过表达慢病毒（CTDP1过表达）组和miR-431-3p mimic+CTDP1过表达（共转染）组。MTT法检测各组SGC-7901细胞增殖活性，克隆形成实验检测各组SGC-7901细胞单克隆形成数，流式细胞术检测各组SGC-7901细胞凋亡率。结果：与癌旁组织比较，胃癌组织中miR-431-3p表达水平降低（P＜0.01）,CTDP1 mRNA表达水平升高（P＜0.01），并且二者表达水平呈负相关关系（r=-0.316,P=0.009）。与GES-1细胞比较，其他5种胃癌细胞中miR-431-3p表达水平均降低（P＜0.01）,CTDP1 mRNA和蛋白表达水平均升高（P＜0.05）。双荧光素酶报告系统，miR-431-3p靶向调控CTDP1表达。与空白组和mimic NC组比较，miR-431-3p组SGC-7901细胞中CTDP1和Bcl-2蛋白表达水平、细胞增殖活性和克隆形成数降低（P＜0.05），细胞凋亡率和细胞中Cyt C及Bax蛋白表达水平升高（P＜0.05）。与空白组和Vector组比较，CTDP1过表达组SGC-7901细胞中CTDP1和Bcl-2蛋白表达水平、细胞增殖活性及克隆形成数升高（P＜0.05）；细胞凋亡率和细胞中Cyt C及Bax蛋白表达水平降低（P＜0.05）。与空白组和miR-431-3p组比较，共转染组SGC-7901细胞中CTDP1和Bcl-2蛋白表达水平、细胞增殖活性及克隆形成数水平升高（P＜0.05），细胞凋亡率和细胞中Cyt C及Bax蛋白表达水平降低（P＜0.05）。结论：miR-431-3p过表达能抑制人胃癌细胞增殖，并促进细胞凋亡，可能是与靶向下调CTDP1基因表达有关。
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