【摘 要】
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从天祝白牦牛(Bos grunneins)的基因组DNA中扩增了Y染色体性别决定基因(SRY)编码区序列,将其克隆至pGEM-Teasy载体,天祝白牦牛SRY基因编码区长687bp,编码229个氨基酸(GenBank
【机 构】
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中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所; 西北民族大学生命科学与工程学院;
【基金项目】
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中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(No.BRF070105)资助
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从天祝白牦牛(Bos grunneins)的基因组DNA中扩增了Y染色体性别决定基因(SRY)编码区序列,将其克隆至pGEM-Teasy载体,天祝白牦牛SRY基因编码区长687bp,编码229个氨基酸(GenBank:FJ373272);对牦牛和奶牛(B. grunneins)的SRY基因编码区进行序列比对,发现存在2个碱基的变异,造成1个氨基酸的变异;将牦牛SRY基因编码区连接至pET-28a(+)载体,成功地构建了表达载体pET-28a/SRY;把表达载体pET-28a/SRY转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中,用IPTG在30℃200r/min条件下诱导,获得了SRY蛋白的大量表达;对表达产物进行Western blot检测,结果显示获得的蛋白能与抗-His单抗特异性结合,确定了牦牛SRY蛋白的表达。
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