【摘 要】
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目的 研究慢病毒介导的解整合素和金属蛋白酶(ADAM)8基因沉默对人胃癌MKN45细胞上皮间质转化(EMT)、侵袭和迁移能力的影响.方法 采用慢病毒转染技术沉默MKN45细胞中ADAM8基因,构建稳定沉默ADAM8的MKN45细胞株,转染空载作为阴性对照组(sh-NC组),转染ADAM8 shRNA为实验组(sh-ADAM8组),同时设置空白对照组(Blank组).Real-time PCR和Western印迹检测ADAM8的表达情况,Western印迹检测MKN45细胞中E-钙粘蛋白(E-cadher-
【机 构】
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青海省交通医院普外科,青海 西宁 810001
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目的 研究慢病毒介导的解整合素和金属蛋白酶(ADAM)8基因沉默对人胃癌MKN45细胞上皮间质转化(EMT)、侵袭和迁移能力的影响.方法 采用慢病毒转染技术沉默MKN45细胞中ADAM8基因,构建稳定沉默ADAM8的MKN45细胞株,转染空载作为阴性对照组(sh-NC组),转染ADAM8 shRNA为实验组(sh-ADAM8组),同时设置空白对照组(Blank组).Real-time PCR和Western印迹检测ADAM8的表达情况,Western印迹检测MKN45细胞中E-钙粘蛋白(E-cadher-in)、波形蛋白(Vimentin)和N-cadherin的表达水平;Transwell实验和划痕实验分别检测沉默ADAM8对MKN45细胞侵袭和迁移能力的影响.结果 慢病毒转染ADAM8 shRNA后,MKN45细胞中ADAM8 mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),提示已成功构建稳定沉默ADAM8基因的MKN45细胞株.与sh-NC组相比,sh-ADAM8组MKN45细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显上调(P<0.05),Vimentin和N-cadherin蛋白表达水平明显下调(P<0.05),侵袭细胞数明显减少(P<0.05),细胞迁移率明显降低(P0.05).结论 ADAM8基因沉默能够抑制胃癌MKN45细胞EMT、侵袭和迁移.
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目的 探讨舒芬太尼对宫颈癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响机制.方法 采用MTT法、流式细胞仪、Tr-answell小室检测不同浓度(0.01、0.02、0.04μg/ml)的舒芬太尼对宫颈癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭能力的影响.采用qRT-PCR检测不同浓度的舒芬太尼对宫颈癌细胞中长链非编码(LncRNA)AWPPH表达水平的影响.利用宫颈癌SiHa细胞为研究对象,实验分组:si-NC组、si-AWPPH组、舒芬太尼0.04+pcDNA3.1组、舒芬太尼0.04+pcDNA3.1-AWPPH组.检测各组
目的 探讨肝癌细胞低氧环境下分泌的外泌体对同源细胞活性的影响.方法 采用差速超速离心法提取低氧环境下人肝癌细胞(HHCC)分泌的外泌体,通过投射电子显微镜观察外泌体的形态学特征,Western印迹检测外泌体特异性蛋白表达.采用CCK-8检测细胞增殖能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力.结果 低氧环境下HHCC分泌的外泌体直径80～130 nm,表达外泌体相关标志蛋白CD9、CD63、CD81.培养48、72 h,外泌体组HHCC的吸光度值明显高于空白对照组(P<0.0
糖尿病肾脏疾病( DKD )是糖尿病最常见的慢性微血管并发症之一,目前已成为全球终末期肾脏病( ESRD )的首位病因〔1〕.DKD 临床特征为蛋白尿,伴血肌酐及尿素氮水平升高,最终进展为肾衰竭;病理特征主要为肾小球硬化及肾间质纤维化〔2〕.目前,DKD主要的治疗策略为控制血糖、血压、血脂、尿蛋白及改善生活方式,但仍很难阻止DKD的发生与发展.DKD病因机制复杂,众多研究认为DKD的发病与氧化应激、炎症因子、糖基化终末产物蓄积、肾素-血管紧张素-醛固酮系统等有关〔3〕.表观遗传是指不依赖DNA序列变化的基
肌少症是指与增龄相关的进行性、全身骨骼肌肌量减少和(或)肌力下降或肌肉生理功能减退的一种疾病〔1〕,是一种常见的老年综合征,中国60 岁以上社区老年人肌少症的发病率达10. 4％ 〔2〕,而肌少症与活动障碍、跌倒、低骨密度及代谢紊乱等密切相关,是老年人生理功能逐渐减退的重要原因和表现之一,可增加老年人的住院率及医疗花费,严重影响老年人的生活质量,甚至缩短寿命〔3〕.目前国内针对肌少症的研究多集中于危险因素调查,发病机制研究较少,而国外有关机制研究则较为深入,并发现衰老过程中蛋白合成与水解作用失衡、神经-肌
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