【摘 要】
：
目的构建携带人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)基因的自身失活型慢病毒载体,观察sTRAIL对人胃癌SGC-7901细胞的诱导凋亡作用,探讨其基因治疗功效。方法构建含人
【机 构】
：
徐州医学院附属医院消化科,徐州医学院附属医院血液科,
论文部分内容阅读
目的构建携带人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)基因的自身失活型慢病毒载体,观察sTRAIL对人胃癌SGC-7901细胞的诱导凋亡作用,探讨其基因治疗功效。方法构建含人sTRAIL基因及内部核糖体进入位点序列(IRES)和绿色荧光蛋白(GFP)基因的双顺反子慢病毒载体。采用脂质体转染法将慢病毒三质粒包装系统包装出的携带人sTRAIL的重组慢病毒,在体外感染人胃癌SGC-7901细胞、正常人肝细胞HL-7702、人胚肺成纤维细胞HLF-1。应用流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,酶联免疫吸附实验(ELISA)评价sTRAIL蛋白在胃癌细胞中的表达。结果成功构建了慢病毒表达质粒pXZ208-sTRAIL,包装的重组慢病毒滴度可达106 IU/mL,可有效感染体外培养的细胞;含sTRAIL的重组慢病毒感染SGC-7901细胞,细胞凋亡率随病毒感染复数(MOI)的增加而升高,呈剂量依赖性;在MOI为6.0、作用24h时,细胞凋亡率最高,可达(29.12±2.87)%,细胞上清中sTRAIL表达量为(34.08±3.43)ng/mL;而在HL-7702、HLF-1等人正常细胞未见明显细胞凋亡。结论含有sTRAIL基因的重组慢病毒载体在体外能够有效地感染胃癌SGC-7901细胞并使其分泌有生物活性的sTRAIL蛋白,可诱导SGC-7901细胞的凋亡,而对正常细胞无显著影响。
其他文献
<正>牙本质过敏症(dentin hypersensitivity,DH),又称过敏性牙本质(hypersensitive dentine),是指牙齿在受到外界刺激,如温度(冷、热)、化学物质(酸、甜)以及机械作用(摩擦或
<正> 中国建筑学会工程勘察学术委员会于1989年11月14～18日在昆明召开了“城市地下水资源管理学术讨论会”。会议代表来自中央各部系统、20多个城市与大专院校共69人。会议共
“教育救国”诞生于民族危难之际西方史学家公认：“直到１７世纪，中国在许多方面比西方优越”。“工业革命”以后，西方“起飞”了，“资产阶级在它不到一百年的阶级统治中所创造的生产
半夏泻心汤出自《伤寒论》,为治疗中气虚弱,升降失司而致脾胃不和的常用方。《伤寒论·辨太阳病脉证并治》:'但满而不痛者,此为痞,柴胡不中与之,宜半夏泻心汤。'
铁西输油管道横跨长庆油田铁边城、吴起、白豹、陇东和西峰五大油区。在管道设计中,针对沿线多种复杂地形地貌、地形起伏落差大以及沿线进油点多、输量变化大等诸多难点,采用
<正>随着信息技术的快速发展,微博、微信、QQ、陌陌、比邻等新媒介迅速引领时代潮流,碎片化学习成为一种新的潮流及趋势。加上智能手机、平板电脑等移动终端设备的普及,学生
随着技术和设备的发展,智能手机、平板电脑和智能电视等智能设备逐渐成为常见网络学习终端,与传统的计算机在线学习共同支持了移动时代新型的混合学习模式。本文以高职《职业
在水网和沙漠地段敷设大口径长输管道，困难．给管沟开挖和管道整体下沟带来很大挑战。会遇到大型工程机械无法进场、管沟不易成型等采用双侧沉管施工方法．可解决这一难题。文章在
<正> Moser(1957)提出用放射性同位素单孔稀释法测定渗透流速以来,经Drost等(1968)和Klotz等(1971)比较系统的宴验工作,使这种方法提高到一个新的高度。过去十多年间,许多国
目的为了建立一种快速分析鉴别中药材人参、西洋参、三七和红参的方法,采用热重-微分热重(TG-DTG)和差热分析(DTA)对人参、西洋参、三七和红参进行热分析研究。方法以α-Al2O