【摘 要】
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目的分析过氧化物酶-4(peroxidase-4,Prx4)与胃癌发生发展的相关性。方法利用甲基硝基亚硝基胍(N-methyl-N′-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)诱导正常胃黏膜细胞GES-1构建癌变细
【机 构】
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兰州大学基础医学院生物化学与分子生物学研究所;
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目的分析过氧化物酶-4(peroxidase-4,Prx4)与胃癌发生发展的相关性。方法利用甲基硝基亚硝基胍(N-methyl-N′-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)诱导正常胃黏膜细胞GES-1构建癌变细胞模型,通过细胞形态、增殖率、迁移能力及集落形成能力的改变,确定MNNG最适浓度及最适诱变时间;经划痕试验、MTT法、集落形成试验、Western blot法和RT-PCR法进一步检测Prx4与胃黏膜上皮细胞恶性转化过程及转化细胞发展过程的相关性。结果MNNG最适浓度为8×10-5 mol/L,最适诱变时间为16 h。细胞恶性转化过程中呈现出细胞相对增殖率、迁移能力、集落形成能力整体升高的趋势;Prx4蛋白表达水平在0~16 h逐渐升高,16~24 h有所下降,而此时Prx4基因mRNA转录水平明显升高。转化细胞发展过程中呈现出细胞相对增殖率、迁移能力、集落形成能力整体逐渐升高的趋势;随着培养时间的增加,Prx4蛋白表达水平逐渐降低,Prx4基因m RNA转录水平无明显变化;但培养24 h时,恶性转化细胞mRNA基因转录水平显著高于正常胃黏膜细胞和胃腺癌细胞(P <0. 01)。结论正常胃黏膜细胞GES-1诱变16 h时已基本发生转化。细胞水平上,Prx4在转化过程中高表达,因此,Prx4主要参与并促进细胞转化过程。
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