目的观察TPP1受到抑制后,对端粒保护蛋白1a(Pot1a)和端粒保护蛋白1b(Pot1b)在端粒上的定位及其对端粒保护功能产生的影响。方法利用逆转录病毒介导的RNA干扰技术抑制小鼠胚胎成纤维样细胞内源性TPP1的表达后,采用免疫荧光/端粒肽核酸荧光原位杂交法检测外源性Pot1a和Pot1b在端粒上的定位,通过端粒末端脱氧尿嘧啶转移酶法检测TPP1降低后对染色体末端保护功能的影响,SA-βgal染色检测细胞衰老,Western blot检测磷酸化的P53水平和P21含量。结果TPP1受到抑制后大约65%的MEF细胞中Pot1a和Pot1b不能定位在端粒上,显著高于空载体对照组的5%(t=10.96,P<0.01);TdT-FITC检测结果显示,大约50%的细胞在TPP1受到抑制后出现TdT-FITC阳性,其中90%的TdT-FITC阳性信号出现在端粒上,而在空载体对照组TdT-FITC阳性细胞为4.7%(t=14.37,P<0.01),位于端粒上的TdT-FITC阳性信号<3%(t=17.59,P<0.01);β-gal染色(细胞衰老的特征性标志)结果显示,在TPP1受到抑制后β-gal阳性细胞率分别达25.7%和22.0%,显著高于对照组细胞的1.7%(t=18.23,P<0.01;t=16.9,P<0.01);进一步研究表明,TPP1受到抑制的细胞导致P53ser18磷酸化,P21表达明显增强。结论TPP1是Pot1a和Pot1b定位在端粒上必需的,抑制TPP1导致染色体末端失去保护功能并诱导P53依赖的细胞衰老。