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目的：建立从血清样品直接扩增乙型肝炎病毒（HBV）全长DNA的方法，构建HBV全基因组克隆。方法：用长链RCR从血清样品一次性扩增HBV全长DNA，测序鉴定后插入质粒pucl9构建含HBV全基因组的重组质粒，再从重组质粒扩增χ基因并进行序列分析。结果：经DNA序列测定和酶切分析，获得HBV全基因组克隆，从克隆的HBV全基因组扩增到χ基因。结论：从血清中可直接扩增到HBV全基因组DNA，为整体水平研究HBV基因组的变异与其致病及宿主抗感染免疫之间的关系奠定了实验基础。