【摘 要】
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目的 探讨澳洲茄碱(SS)对压力超负荷诱导的小鼠心肌纤维化(MF)的影响.方法 使用主动脉缩窄术(AB)建立小鼠心肌纤维化模型,采用随机数字表法将40只8～10周雄性C57/B6小鼠随机分为假手术组、假手术+SS组、AB组、AB+SS组,每组10只.AB手术3周后,AB+SS组每天腹腔注射SS(10 mg/kg),AB组每天腹腔注射等量的生理盐水;假手术处理3周后,假手术+SS组每天腹腔注射SS(10 mg/kg),假手术组每天腹腔注射等量的生理盐水.腹腔注射1周后行心脏超声检测各组小鼠心功能[左室射血分
【机 构】
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武汉大学人民医院心血管内科,湖北武汉430060;武汉大学人民医院代谢与相关慢病湖北省重点实验室,湖北武汉430060
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目的 探讨澳洲茄碱(SS)对压力超负荷诱导的小鼠心肌纤维化(MF)的影响.方法 使用主动脉缩窄术(AB)建立小鼠心肌纤维化模型,采用随机数字表法将40只8～10周雄性C57/B6小鼠随机分为假手术组、假手术+SS组、AB组、AB+SS组,每组10只.AB手术3周后,AB+SS组每天腹腔注射SS(10 mg/kg),AB组每天腹腔注射等量的生理盐水;假手术处理3周后,假手术+SS组每天腹腔注射SS(10 mg/kg),假手术组每天腹腔注射等量的生理盐水.腹腔注射1周后行心脏超声检测各组小鼠心功能[左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)及左室舒张末期内径(LVEDD)]并取材;采用天狼猩红染色观察各组心脏组织纤维化情况;采用qPCR法检测心肌纤维化标志物的mRNA表达水平;采用免疫印迹法(Western blot)检测心肌组织中纤维化相关信号通路变化.向原代培养的大鼠成纤维细胞中分别加入磷酸缓冲盐溶液(PBS)、PBS+p38 MAPK 抑制剂(SB203580)、PBS+SS、TGF-β1+PBS、TGF-β1+SB203580、TGF-β1+SS,24 h后收集细胞进行后续检测.结果 本研究成功制备心肌纤维化小鼠模型.与AB组相比,AB+SS组的LVEF及LVFS水平明显升高(P＜0.05),LVEDD水平明显降低(P＜0.05);AB+SS组间质和血管周围胶原沉积程度高于 AB 组(P＜0.05),AB+SS 组的 COL-1、COL-3和 TGF β mRNA 相对水平显著低于 AB 组(P＜0.05);AB+SS组的p38 MAPK磷酸化水平低于AB组(P＜0.05);体外细胞实验结果显示,TGF-β1+SS组和TGF-β1+p38 MAPK特异性抑制剂(SB203580)组的COL-1、COL-3、TGF-β mRNA水平显著低于TGF-β1+PBS组(均P＜0.05).结论 澳洲茄碱可抑制p38 MAPK的磷酸化,进而改善压力超负荷诱导的小鼠心肌纤维化.
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