【摘 要】
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目的 探讨miR-122在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)小鼠肾组织中的表达变化以及沉默miR-122对DN小鼠肾组织的影响及可能的机制.方法 采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射联合高糖高脂饮食建立C57BL/6小鼠DN模型.将造模成功的30只DN小鼠随机分为模型组、antagomir-NC组、antagomir-122组,每组10只,另外选取未做任何处理的健康C57BL/6小鼠10只作为正常对照组.造模成功后,antagomir-122组和antagomir-NC组每7 d分别
【机 构】
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山东中医药大学第二附属医院肾病诊疗中心,济南 250000;山东中医药大学附属医院内分泌科,济南 250000
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目的 探讨miR-122在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)小鼠肾组织中的表达变化以及沉默miR-122对DN小鼠肾组织的影响及可能的机制.方法 采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射联合高糖高脂饮食建立C57BL/6小鼠DN模型.将造模成功的30只DN小鼠随机分为模型组、antagomir-NC组、antagomir-122组,每组10只,另外选取未做任何处理的健康C57BL/6小鼠10只作为正常对照组.造模成功后,antagomir-122组和antagomir-NC组每7 d分别给予尾静脉注射antagomir-122和antagomir-NC进行干预,模型组和正常对照组给予尾静脉注射等量生理盐水代替.8周后收集血清、尿液后处死小鼠取得肾标本,自动生化仪检测血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)和24 h尿蛋白定量水平,过碘酸雪夫(PAS)染色评价肾组织病理学变化,qRT-PCR检测肾组织miR-122的表达水平,试剂盒检测肾组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,Western blot检测肾组织Sirt1、α-SMA、fibronectin蛋白的表达水平.结果 与正常对照组比较,模型组小鼠肾小球硬化评分上升(P<0.05),肾组织miR-122和α-SMA、fibronectin蛋白的表达明显升高(P<0.05),血清Cr、BUN水平,24 h尿蛋白定量水平,肾组织MDA水平明显增高(P<0.05),肾组织GSH-Px和SOD水平、Sirt1蛋白表达水平均明显降低(P0.05).与antagomir-NC组比较,antagomir-122组小鼠肾小球硬化评分下降(P<0.05),肾组织miR-122和α-SMA、fibronectin蛋白的表达明显降低(P<0.05),血清Cr、BUN水平,24 h尿蛋白定量水平,肾组织MDA水平明显下降(P<0.05),肾组织GSH-Px和SOD水平、Sirt1蛋白表达水平均明显升高(P<0.05).结论 miR-122在DN小鼠肾组织中表达升高.沉默miR-122通过抗氧化应激和纤维化对DN小鼠肾组织起到明显的保护作用,其机制可能与其对Sirt1基因的调控有关.
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