【摘 要】
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目的:探索采用体外连接技术替代同源重组方法构建Ad-BMP-2,优化腺病毒载体构建方法.方法:将BMP-2基因连接到辅助载体pShuttle2后,以限制性内切酶PI-Sce Ⅰ及Ⅰ-Ceu Ⅰ酶切,获
【机 构】
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山东大学口腔医学院,山东大学齐鲁医院临床基础研究所,山东大学齐鲁医院口腔科
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目的:探索采用体外连接技术替代同源重组方法构建Ad-BMP-2,优化腺病毒载体构建方法.方法:将BMP-2基因连接到辅助载体pShuttle2后,以限制性内切酶PI-Sce Ⅰ及Ⅰ-Ceu Ⅰ酶切,获得含启动子Pcmvie的BMP-2基因片段,然后将其连接到经同样双酶切的Adeno-X载体上,获得含BMP-2基因的重组腺病毒载体Ad-BMP-2.将其以限制性内切酶Pac Ⅰ酶切线性化后,转染HEK293细胞,包装重组腺病毒颗粒,并采用PCR方法对重组腺病毒进行鉴定.结果:重组载体pShuttle2-BMP
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