论文部分内容阅读
目的：构建连接 CX43表达载体，并观察其在人子宫内膜腺细胞中的表达。方法：采用含有增强型绿色荧光蛋白为报告基因的 pIRES2－EGFP 质粒为表达载体，通过双酶切的方法将 CX43片段插入增强型绿色荧光蛋白上游的多克隆位点 XhoⅠ和 NheⅠ之间，使外源性基因 CX43就和EGFP 同水平表达。脂质体法转染人子宫内膜腺细胞，即逆转录 PCR 和蛋白质印迹法检测细胞中 CX43基因及蛋白表达。结果：对重组质粒的双酶切鉴定和测序结果证明，CX43表达载体构建成功；RT －PCR 检测转染组细胞中 CX43 mRNA 表达水平明显高于对照组及空载体组，Western Blot 检测转染组细胞中 CX43蛋白表达水平明显高于对照组及空载体组，差异均具有统计学意义（P ＜0．05）。结论：我们成功地构建了 CX43表达载体pIRES2－CX43－EGFP，并且该载体能在真核细胞人子宫内膜腺细胞中稳定表达。