【摘 要】
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根据GenBank中的牛IL-2基因序列,设计一对引物Pa和Pd,以牛外周血淋巴细胞为材料,用RT-PCR方法扩增得到牛IL-2 cDNA,测序发现在扩增产物的第240位缺失了一个A碱基.采用重叠延
【机 构】
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南京农业大学动物医学院,上海市农业科学院畜牧兽医研究所,南京师范大学生命科学院
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根据GenBank中的牛IL-2基因序列,设计一对引物Pa和Pd,以牛外周血淋巴细胞为材料,用RT-PCR方法扩增得到牛IL-2 cDNA,测序发现在扩增产物的第240位缺失了一个A碱基.采用重叠延伸剪接术(SOE法)向突变体定点插入该碱基,然后与表达载体连接,获得了正确的表达产物.经RT-PCR检测证明,重组的牛IL-2蛋白具有较好的生物学活性,能诱导肿瘤坏死因子TNF-α和干扰素IFN-γ的产生.
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