X射线诱导人鼻咽鳞状细胞癌CNE1细胞耐药相关通路的研究

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目的

探讨经X射线照射后人鼻咽鳞状细胞癌CNE1细胞耐药性的产生与血小板内皮细胞黏附分子-1(PECAM-1)/磷酯酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/Bcl-2信号通路的关系。

方法

①对CNE1细胞进行培养,待细胞进入对数生长期后,进行X射线照射,2 Gy/次,隔天照射1次,累积剂量50 Gy,收集照射后获得的CNE1/R细胞。②CNE1/R细胞培养24 h后,分为3组:对照组、实验组一(经1∶600的PECAM-1抗体作用24 h)、实验组二(经10 μmol/L的PI3K抑制剂LY294002作用24 h)。③利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法分别检测对照组和两个实验组CNE1/R细胞对顺铂的半抑制浓度(IC50)值。④半定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术分别检测对照组和实验组一PI3K mRNA和Bcl-2 mRNA的表达情况。⑤半定量RT-PCR技术分别检测对照组和实验组二AKT mRNA和Bcl-2 mRNA的表达情况。

结果

①对照组、实验组一和实验组二的IC50值分别为(2.99±0.02)μg/ml、(1.50±0.03)μg/ml、(1.60±0.05)μg/ml,3组间比较差异具有统计学意义(F=4 381.263,P=0.000),两实验组的IC50均较对照组明显降低(t=116.885,P=0.000;t=73.006,P=0.000)。②对照组和实验组一的PI3K mRNA的半定量值分别为1.66±0.01和0.90±0.05(t=50.394,P=0.000);Bcl-2 mRNA的半定量值分别为1.66±0.02和0.71±0.05(t=183.165,P=0.000),差异均具有统计学意义。③对照组和实验组二的AKT mRNA的半定量值分别为1.53±0.01和0.72±0.01(t=135.281,P=0.000);Bcl-2 mRNA的半定量值分别为1.66±0.02和0.63±0.02(t=128.814,P=0.000),差异均具有统计学意义。

结论

X射线照射后人鼻咽鳞状细胞癌CNE1细胞耐药性的产生,可能与PECAM-1通过PI3K/AKT途径调节Bcl-2的活性有关。

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