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以荧光纳米微球标记抗体，建立免疫层析检测方法，配合荧光定量仪，可高灵敏度地检测样本中4种四环素类药物的残留含量，实现鲜奶中所含四环素类药物的总量检测。结果表明，本方法对四环素的检测下限达10μm／L，对金霉素、土霉素、多西环素回收率均达70％以上，除了与链霉素有0．32％的交叉反应率外，与其他药物没有交叉反应，整个检测过程只需15min左右。通过建立的荧光定量免疫层析法，实现了四环素总量的快速定量检测。