【摘 要】
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目的 建立更加科学且简易的新生SD大鼠皮质神经元缺氧模型的方法.方法 取24 h内的新生SD大鼠皮质,用木瓜酶和DNaseⅠ共同消化,10% FBS的DMEM/F12培养液终止消化,用10% FBS的D
【机 构】
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汕头大学医学院,广东汕头,515041汕头大学医学院第一附属医院儿科,广东汕头,515041;
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目的 建立更加科学且简易的新生SD大鼠皮质神经元缺氧模型的方法.方法 取24 h内的新生SD大鼠皮质,用木瓜酶和DNaseⅠ共同消化,10% FBS的DMEM/F12培养液终止消化,用10% FBS的DMEM/F12种植培养,4 h后换成无血清neurobasal配制的维持培养液,未加入阿糖胞苷培养,允许部分胶质细胞生长,第9天用免疫荧光法鉴定神经元的纯度,7～10 d用于缺氧模型,在37℃、无糖DMEM、高纯N2环境中缺氧1～6 h,观察皮质神经元缺氧后形态学的变化,根据实验目的 选择最适合的缺氧时间,建立缺氧模型.结果 培养第10天,神经元胞体饱满,结构清晰完整,神经元纯度荧光鉴定结果为82.04%.随着缺氧时间的增加,皮质神经元胞体和突起逐渐经历水肿到裂解的过程.结论 有部分胶质细胞的生长,建立了更加科学且简易的新生SD大鼠皮质神经元缺氧模型.
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