小鼠cyclinA2正义和反义真核表达载体的构建及鉴定

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目的构建小鼠cyclinA2的正义和反义真核表达载体。方法采用小鼠胚胎组织取材,提取总RNA。设计引物,采用RT—PCR方法扩增小鼠cyclinA2mRNA得到cyclinA2的DNA,将此DNA插入pGEM—T载体,转化人JM109感受态细菌。将鉴定得到的重组质粒进行扩增,EcoRI酶切后,回收cyclinA2目的片段亚克隆人pcDNA3.1真核表达载体。酶切筛选鉴定重组的真核表达载体pcDNA3.1-cyclinA2。结果将小鼠基因的开放阅读框(ORF)重组到真核表达载体pcDNA3.1内,用EcoR
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