乙型肝炎病毒X基因克隆及其表达

来源 :中南大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：lm4194

【摘要】

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目的:构建乙型肝炎病毒X基因原核表达载体,并诱导其表达.方法:从乙肝病人血清中提取HBV DNA;以带有EcoRI和Hind Ⅲ酶切位点的引物,用PCR方法扩增X基因;而后定向克隆到原核表

【作者】

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唐世刚杨兵厂

【机构】

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中南大学湘雅三医院感染病科

【出处】

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中南大学学报(医学版)

【发表日期】

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2005年5期

【关键词】

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乙型肝炎病毒克隆乙型肝炎病毒X蛋白表达 hepatitis B virus cloning HBV X protein expression

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目的:构建乙型肝炎病毒X基因原核表达载体,并诱导其表达.方法:从乙肝病人血清中提取HBV DNA;以带有EcoRI和Hind Ⅲ酶切位点的引物,用PCR方法扩增X基因;而后定向克隆到原核表达载体pMAL-C2X上,经酶切鉴定和序列分析;以IPTG诱导X融合蛋白的表达.结果:PCR扩增显示有类似HBV X基因片断大小的条带;构建的原核表达重组体PMAL-C2X-HBV-X经酶切有相应大小的的基因插入片断,序列分析证实为正确的有完整读码框的X基因;这一重组体在IPTG诱导下有相应大小的X融合蛋白表达.结论:成

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