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目的构建非洲爪蟾和小鼠血管内皮细胞生长因子重组表达载体,进行蛋白质原核表达,并对表达产物进行分离、纯化和鉴定.方法首先通过限制性核酸内切酶酶切及连接反应,构建非洲爪蟾和小鼠血管内皮细胞生长因子的原核表达载体pET-xVEGF和pET-mVEGF.筛选的重组质粒经酶切和DNA序列测定等证实正确性后,再转染感受态大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导蛋白质表达.表达产物经Ni-NTA亲合层析及肠激酶特异性酶切进行分离纯化,最后用SDS-PAGE和蛋白免疫印迹法进行鉴定. 结果限制性核酸内切酶酶切和DNA序