【摘 要】
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目的:探讨细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent-kinase 2,CDK2)活性对肝癌细胞株HepG2细胞周期和细胞凋亡的影响。方法:根据基因库中登录的人和鼠CDK2、cyclinE序列,设
【机 构】
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内蒙古自治区医院检验科,内蒙古医学院
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目的:探讨细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent-kinase 2,CDK2)活性对肝癌细胞株HepG2细胞周期和细胞凋亡的影响。方法:根据基因库中登录的人和鼠CDK2、cyclinE序列,设计并构建CDK2、cyclinE干扰RNA真核表达载体;脂质体法转染肝癌细胞株HepG2细胞,流式细胞术分析CDK2及cyclinE对HepG2细胞增殖的影响;蛋白质印迹法检测CDK2、cyclinE活性的变化caspase-3活性的影响。结果:1.成功构建CDK2及cyclinE干扰RNA真核表达载体psiCDK2、psiCyclinE,用脂质体法导入肝癌细胞株HepG2细胞中,有效表达。2.转染48h后与空载体组相比:psiCDK2、psiCyclinE组G1期细胞增多,G2/M和S期细胞减少;蛋白质印迹法分析表明psiCDK2、psiCyclinE组caspase-3酶原被激活。结论:靶向CDK2、cyclinE的siRNA能抑制HepG2细胞的增殖;靶向CDK2、cyclinE的siRNA能激活caspase-3,诱导肝癌细胞HepG2凋亡。
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