【摘 要】
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目的 研究人类白细胞抗原-G (HLA-G)在肾移植受者外周血外泌体中的表达情况.方法 以2012年1月至2014年6月在单中心进行同种异体肾移植术且术后无排斥反应的12例肾移植受者(肾
【机 构】
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解放军第三○九医院全军器官移植研究所移植研究所 北京市器官移植与免疫调节重点实验室,北京,100091
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目的 研究人类白细胞抗原-G (HLA-G)在肾移植受者外周血外泌体中的表达情况.方法 以2012年1月至2014年6月在单中心进行同种异体肾移植术且术后无排斥反应的12例肾移植受者(肾移植组)以及健康志愿者(对照组)5例为研究对象.每个对象收集5ml外周血并采用总外泌体提取试剂盒提取总外泌体.通过透射电子显微镜观察外泌体的大小及形态;流式细胞术检测血浆外泌体表面CD63、CD73、CD81和CD106的表达;蛋白印迹方法分析HLA-G在外泌体的表达情况.结果 在肾移植组12例中9例以及对照组5例中2例的外周血血浆获得外泌体,可见大小不一、呈现类似圆形或椭圆形、直径为40～100 nm的膜性微囊泡结构,透射电子显微镜下观察,符合外泌体形态和结构.将其标志分子CD63抗体包被磁珠实现捕获,肾移植组CD81阳性率为(78.57±12.35)％,CD106为(45.39±11.23)％,CD73为(63.37±15.62)％;对照组CD81阳性率为(35.37±8.42)％,CD106为(12.44±2.31)％,CD73为(10.23±2.57)％.肾移植组9例受者血浆外泌体均表达HLA-G;对照组5例仅中1例呈低表达.结论 肾移植术后无排斥反应患者血浆外泌体高表达HLA-G,外泌体可能在移植后的免疫耐受中发挥着重要作用.
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