拟南芥抗旱相关基因的表达载体构建及转基因植株鉴定

来源 :合肥工业大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xiaoyaoju911

【摘要】

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文章以拟南芥Col-0植株的基因组DNA和cDNA为模板扩增出LWT2基因全长和CDS片段,用pEASY-Blunt Zero Cloning Kit试剂盒连接至中间载体,转化到Trans1-T1感受态细胞内,通过单克

【作者】

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顾进宝阳立波曹树青

【机构】

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合肥工业大学生物与食品工程学院

【出处】

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合肥工业大学学报：自然科学版

【发表日期】

：

2015年2期

【关键词】

：

拟南芥转基因过表达 LWT2基因 Arabidopsis transgene overexpression LWT2 gene

【基金项目】

：

高等学校博士学科点专项科研基金资助项目（20120111110009）,中国博士后科学基金资助项目（2012M521213）和安徽省自然科学青年基金资助项目（1308085QC56）

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文章以拟南芥Col-0植株的基因组DNA和cDNA为模板扩增出LWT2基因全长和CDS片段,用pEASY-Blunt Zero Cloning Kit试剂盒连接至中间载体,转化到Trans1-T1感受态细胞内,通过单克隆挑选、菌落聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）鉴定及质粒测序验证获得DNA阳性克隆。利用限制性内切酶双酶切获得含有黏性末端的目的片段和载体片段,进行DNA连接反应可得最终的互补和过表达构建。提取质粒DNA测序确认后将2个构建分别转化至农杆菌菌株GV3

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