【摘 要】
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用RT-PCR扩增肠激酶轻链(EKLC，Enterokinase Light Chain)的cDNA，并克隆至酵母分泌型表达质粒pPICZαA中．将重组质粒pPICZαA／EKLC转化至表达宿主pichia pastoris GS115，经甲醇诱
【基金项目】
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国家重大科技专项"创新药物和中药现代化"(2002AA2Z3451)
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用RT-PCR扩增肠激酶轻链(EKLC，Enterokinase Light Chain)的cDNA，并克隆至酵母分泌型表达质粒pPICZαA中．将重组质粒pPICZαA／EKLC转化至表达宿主pichia pastoris GS115，经甲醇诱导，目标蛋白EKLC表达并分泌至酵母培养基中．采用Zn—Sepharose亲和层析一步纯化，从每升培养液可获得1．6mg EKLC，其纯度达90％以上．酶反应动力学结果表明，EKLC对小分子底物Gly-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys-β-naphthyla
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