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重组人肿瘤坏死因子α－工程菌经发酵培养、破菌后，上清再经热处理，硫酸铵分级沉淀，然后过ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５、ＤＥＡＥＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ和Ｓｅｐｈａｃｒｙ１Ｓ－１００柱层析进行再纯化。结果显示，经多步层析纯化后ｒｈＴＮＦα上率达２７％，纯化倍数达２３６倍。连续纯化３批，纯度均达９６％以上，比活性达３．９×１０＾６Ｕ／ｍｇ蛋白。提示所建立的纯化工艺稳定，为ｒｈＴＮＦα的基础研究和临床奠定