【摘 要】
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目的:探讨miRNA-30a是否通过影响Th17细胞分化参与ITP发病;通过对miRNA-30a预测靶基因SOCS3的验证,进一步探讨miRNA-30a参与ITP发病的可能机制.方法:建立慢性ITP小鼠模型,检
【机 构】
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苏州大学附属儿童医院血液科,江苏苏州,215000;苏州大学附属第一人民医院血液科,江苏苏州,215000;
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目的:探讨miRNA-30a是否通过影响Th17细胞分化参与ITP发病;通过对miRNA-30a预测靶基因SOCS3的验证,进一步探讨miRNA-30a参与ITP发病的可能机制.方法:建立慢性ITP小鼠模型,检测其脾脏单个核细胞中miRNA-30a、RoR γt的表达并分析两者相关性;构建含靶基因mRNA 3UTR的荧光素酶表达载体及含有miRNA的绿色荧光载体,通过Luciferase荧光检测、实时荧光定量PCR(qPCR)、West blot验证SOCS3是否为miRNA-30a的靶基因.结果:实验组小鼠血小板计数在注射抗小鼠血小板血清(APS) 48 h后下降至正常的20％,且至少可维持14d.实验组小鼠脾脏单个核细胞中miRNA-30a及RoRYt表达较对照组升高(P＜0.05),且两者存在正性相关(r=0.54).pMDH-GFP-miRNA-30a与pMIR-report-UTR实验组的荧光素酶的活性明显低于pMDH-GFP空质粒与pMIR-report-UTR的对照组(P＜0.05).转染miRNA-30a质粒的EL4细胞中SOCS3在mRNA及蛋白水平与对照组均无差异.结论:miRNA-30a在ITP小鼠脾脏单个核细胞中表达升高,且与ROR γt表达呈正相关性,它可能通过影响Th17细胞分化参与ITP发病;SOCS3能与miRNA-30a靶位点结合,却不是其功能靶基因.
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