【摘 要】
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[目的]获得抗Cu2+的单克隆抗体.[方法]以异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸( ITCBE)为双功能螯合剂,使Cu2+分别与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)偶联,获得免疫原(Cu-ITCBE
【机 构】
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吉林大学人兽共患病教育部重点实验室
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[目的]获得抗Cu2+的单克隆抗体.[方法]以异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸( ITCBE)为双功能螯合剂,使Cu2+分别与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)偶联,获得免疫原(Cu-ITCBE-BSA)和检测原(Cu-ITCBE-OVA).用非变性聚丙烯凝胶电泳鉴定偶联结果.免疫Balb/C小鼠,通过细胞融合,获得能稳定分泌抗Cu2的杂交瘤细胞株,并通过亲和层析法纯化腹水获得抗Cu2+的单克隆抗体.[结果]获得了1株能稳定分泌抗Cu2+的单克隆抗体的细胞株(4A6),所分泌的抗体亚类为IgG1,细胞培养上清效价可达1:1.0×103,腹水效价可达1:6.4×105.以该细胞株接种Balb/C小鼠腹腔,获得抗Cu2+的腹水型单抗；该腹水经过亲和层析法纯化后,纯度可达95％.[结论]获得了抗Cu2+的单克隆抗体,为环境水样中Cu2+的免疫学检测奠定基础.
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