霍乱弧菌CTB基因的克隆、表达及重组蛋白活性分析

来源 :中国生物工程杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aerostock
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霍乱弧菌CTB蛋白具有免疫佐剂活性。根据已发表CTB基因的序列设计一对引物,从一株霍乱弧菌中扩增出CTB基因,测序后发现该基因全长375bp,与国内分离的六株CTB基因的同源性达96.0%-99.2%。将该基因与pTWIN1连接构建了原核表达载体pTWIN1-CTB,重组表达载体转化BL21(DE3)表达菌株,0.8mmol/LIPTG诱导4h后,收获的细菌总蛋白SDS—PAGE电泳显示CTB在原核表达系统中得到表达,融合蛋白大小与理论值符合,蛋白产量占细菌总蛋白的20%左右,主要以包涵体形式存在,Wes
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