【摘 要】
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目的:探讨miRNA-122(miR-122)在脓毒症急性肾损伤(SAKI)中的表达模式及作用.方法:将C57BL6小鼠30只随机分为0h、4h、8h、12 h、24 h组,每组6只.0h组为对照组不做任何处理,其它组均采用盲肠结扎穿孔(CLP)法建立小鼠脓毒症模型.建模后4h、8h、12 h、24 h分别处死小鼠,收集血清、肾组织备用.采用全自动生化分析仪检测小鼠血清中肌酐、尿素氮水平;对肾脏组织石蜡切片,应用苏木精-伊红(HE)染色法进行染色,光镜下观察肾组织结构损伤变化;ELISA法检测小鼠肾组织中
【机 构】
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长治医学院2017级临床医学教改1702班 046000;长治医学院2017级实验技术1701班;长治医学院生理学教研室
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目的:探讨miRNA-122(miR-122)在脓毒症急性肾损伤(SAKI)中的表达模式及作用.方法:将C57BL6小鼠30只随机分为0h、4h、8h、12 h、24 h组,每组6只.0h组为对照组不做任何处理,其它组均采用盲肠结扎穿孔(CLP)法建立小鼠脓毒症模型.建模后4h、8h、12 h、24 h分别处死小鼠,收集血清、肾组织备用.采用全自动生化分析仪检测小鼠血清中肌酐、尿素氮水平;对肾脏组织石蜡切片,应用苏木精-伊红(HE)染色法进行染色,光镜下观察肾组织结构损伤变化;ELISA法检测小鼠肾组织中IL-1β的表达水平;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肾脏miR-122的表达水平.采用Pearson相关性分析miR-122与IL-1[β水平的相关性.结果:CLP术后小鼠尿素氮、肌酐水平随时间延长逐渐升高;术后尿素氮12h组[(12.8±4.12) mmol·L-1]、24 h组[(22.53±5.19) mmol·L-1]均高于0h组[(4.55±0.98) mmol·L-1],术后肌酐12 h组[(53.87±6.6) μmol·L-1]、24 h组[(69.32±13.34) μmol·L-1]均高于0h组[(5.62±2.07) μmol·L-1],差异有统计学意义(P＜0.05);HE染色显示,与0h组比较实验组肾脏组织均出现不同程度损伤;qPCR结果显示,CLP术后各组肾组织中miR-122表达水平[4 h(0.79±0.14)、8 h(0.55±0.15)、12 h(0.51±0.09)、24h(0.53±0.11)]与0h组比较明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05);ELISA结果显示,各组IL-1β表达水平[4 h(304.20±30.24)、8 h(338.46±13.91)、12 h(345.46±16.27)、24 h(256.17±9.35) pg·mL-1]与0h组[(191.44±16.79) pg·mL-1]比较显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05);肾组织中miR-122与IL-1β表达呈负相关(r=-0.560,P＜0.05).结论:miR-122在脓毒症AKI小鼠肾组织中表达下降,并可能通过促进炎症因子的释放参与脓毒症AKI的发生发展.
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