【摘 要】
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[目的]构建和鉴定针对人抑凋亡基因livin的siRNA质粒载体,并研究其对宫颈癌HeLa细胞的作用.[方法]设计和合成针对人livin基因的siRNA寡核苷酸,定向克隆人质粒载体pmU6.脂质体
【机 构】
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中山大学中山医学院药理教研室,广东,广州,510080
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[目的]构建和鉴定针对人抑凋亡基因livin的siRNA质粒载体,并研究其对宫颈癌HeLa细胞的作用.[方法]设计和合成针对人livin基因的siRNA寡核苷酸,定向克隆人质粒载体pmU6.脂质体瞬时转染入HeLa细胞中,用RT-PCR技术检测livin基因的mRNA表达水平,Westem Blot技术检测Livin蛋白表达水平.用MTT法分析HeLa细胞增殖改变,流式细胞仪检测HeLa细胞周期变化.[结果]livin siRNA表达质粒能高效而特异地剔除HeLa细胞中livin的表达,抑制肿瘤细胞增殖(P＜0.05),将HeLa细胞阻止在G1期.[结论]livin基因的siRNA对HeLa细胞增殖和细胞周期调控有重要影响,细胞凋亡可能是导致其细胞死亡的主要原因.
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