人胃癌细胞株SGC-7901的克隆形态观察及含肿瘤干细胞克隆的鉴定

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目的 动态观察人胃癌SGC-7901细胞的克隆在形态上的差异,比较不同克隆细胞的裸鼠体内成瘤能力,并鉴定含胃癌干细胞的克隆.方法 采用克隆形成实验观察胃癌SGC-7901细胞克隆的形态并分类,计算克隆形成率和每种克隆的比例.采用免疫荧光技术和Western blot法检测不同克隆细胞中CD44和CDX2的表达.分离不同形态的克隆,检测其自我更新能力.将不同形态的克隆细胞分别接种于裸鼠皮下,观察各组克隆细胞的体内成瘤能力.结果 SGC-7901细胞可形成3种克隆形态,即紧密型克隆、中间型克隆和松散型克隆.SGC-7901细胞总的克隆形成率为(9.80±1.07)%,其中紧密型、中间型和松散型克隆所占的比例分别为10.2%、56.0%和33.8%.免疫荧光法检测的结果显示,CD44在紧密型克隆细胞中的表达明显强于中间型和松散型克隆,而CDX2在紧密型克隆细胞中的表达最弱.Western blot法检测结果与免疫荧光法检测的结果一致.紧密型克隆细胞具有很强的自我更新能力,在裸鼠体内的成瘤能力也较强,接种103和104个细胞的成瘤率分别为75.0%和100%.结论 SGC-7901细胞的克隆在形态和分化程度上存在差异,其中紧密型克隆可能富含胃癌干细胞.

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