微小RNA-144对2型糖尿病骨髓间充质干细胞成骨能力的影响

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目的

探究微小RNA-144(miR-144)在对2型糖尿病骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨能力的影响。

方法

构建2型糖尿病大鼠模型,并从中提取出BMSCs,在高糖骨诱导培养基下,将细胞分组为miR-144-mimic、mimic-NC、miR-144-inhibitor以及inhibitor-NC组,分别通过蛋白印迹法(Western blot)及荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测各组细胞中成骨相关基因Runt相关基因2(Runx2)、OCN、碱性磷酸酶(ALP)以及通路蛋白Smad1的蛋白及mRNA水平,采用生物信息学技术及双荧光素酶报告基因实验验证miR-144对Smad1的靶向调控作用,并通过ALP活性检测和茜素红染色评估miR-144对细胞成骨分化程度的影响。两组间用独立样本t检验,两组以上的比较采用方差分析。

结果

miR-144在miR-144 mimic组中表达水平(2.24±0.32)明显高于mimic-NC组(1.12±0.08),两组间差异有统计学意义(t=9.225,P

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