【摘 要】
：
目的 建立带有内参照的双重实时荧光定量PCR方法检测血浆DNA含量.方法 构建重组质粒DNA作为内参照物,采用共用下游引物的双重实时荧光定量PCR技术同步扩增人看家基因β-actin
【机 构】
：
南京医科大学第一附属医院临床检验中心
【基金项目】
：
江苏省抗病毒药物临床试验服务中心资助项目;江苏省政府135重点实验室科研基金;江苏省卫生厅指导课题
论文部分内容阅读
目的 建立带有内参照的双重实时荧光定量PCR方法检测血浆DNA含量.方法 构建重组质粒DNA作为内参照物,采用共用下游引物的双重实时荧光定量PCR技术同步扩增人看家基因β-actin和重组质粒载体中人工合成DNA序列,定量检测健康成年人血浆DNA含量.结果 本法能在同一个反应管中对目的基因和内参照进行同步扩增,两者的扩增无相互干扰,特异性好;重组质粒DNA的平均扩增效率达90%,β-actin基因的平均扩增效率接近100%;本法批内变异系数(CV)11%,批间CV17%.结论 成功建立含有内参照的双重实时荧光定量PCR方法,可对血浆DNA进行定量检测.
其他文献
施工升降机的制造业日益发展起来,底座是升降机的主要部件之一,但原设计存在着一些不足,不仅不便于制造、安装,而且还存在着安全隐患,笔者对该部件进行了改进,实践证明,改进
目的:优选转输颗粒的最佳成型工艺。方法:研究不同辅料对颗粒成型性、吸湿性及溶化性的影响,运用综合评分的方法筛选出最佳辅料,并采用正交试验设计,以成型率为指标优选出辅
目的总结心房插入点远离三尖瓣环的右侧游离壁旁道的体表心电图及腔内电生理特点,以及消融经验。方法从2006年1月到2009年5月,共对127例右侧旁道患者进行了射频消融,入选其中
目的研究治疗剂量三氧化二砷（As2O3）对急性早幼粒细胞白血病（APL）患儿的肝脏毒性。方法对41例APL患儿静脉滴注As2O3注射液,同时进行肝脏毒性监测：肝功能的动态变化、分析影响因素
目的研究白三烯受体（CysLT1）中927T/C（rs320995）位点基因多态性在温州地区汉族儿童中的分布特征及其对哮喘临床特征的影响。方法采用DNA测序法检测122例汉族哮喘患儿（哮喘组）和100
稻瘟病是目前最具毁灭性的作物病害之一.本研究通过由田间菌株CHL346和CHL42杂交得到的189个子囊孢子菌株构建的分离群体,在亲本菌株CHL346中鉴定到了与水稻稻瘟病抗性基因Pi
目的 评价血清饥饿和接触抑制两种方法对细胞周期GO期同步化效果,并分析再进入细胞周期各期的时点.方法 利用体外细胞培养技术,采用流式细胞术分析人胚肺成纤维细胞血清饥饿0
目的探讨尖锐湿疣(CA)患者治疗前、后血清白细胞介素18(IL-18)、干扰素γ(IFN-γ)和白细胞介素10(IL-10)的水平变化在CA免疫发病机制中的作用。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA
种子休眠是指有活力的种子在适宜的萌发条件下而不能萌发的现象.种子休眠主要有两种休眠类型即由种皮引起的休眠和由胚引起的休眠.然而实际中有些种子同时存在着这两种休眠类
连续三年多点研究钾氮配施对大蒜生长及养分吸收利用的影响。结果表明:施用钾肥对大蒜的生长发育有明显的促进作用,三年试验平均,蒜苗、蒜苔和蒜头产量较不施钾的对照分别增