杀菌/通透性增强蛋白N端cDNA的克隆和表达

来源 :第四军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ahhscyf
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目的 克隆杀菌/通透性增强蛋白(BPI)N端cDNA,构建原核和真核表达载体,分别在大肠杆菌和CHO细胞中表达BPI蛋白。方法 提取正常人外周血多形核粒细胞(PMN)总RNA,经套式TR-PCR法扩增出BPIN端cDNA片段,将其克隆人pGEM-T easy载体中并进行酶切鉴定和序列测定。然后亚克隆入pGEX-4T-1质粒,转化大肠杆菌,进行诱导表达,表达产物用Western blot法鉴定。同时将该基因片断克隆入pcDNA3质粒,通过脂质体转染CHO细胞,免疫荧光法鉴定BPI的表达。结果 获得BPIN端
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