【摘 要】
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目的建立茎环引物实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(fqRT-PCR)检测微小RNA(miRNA)的定量检测方法。方法选择300例心肌梗死患者作为心肌梗死组,心肌梗死组患者根据病情再分为
【机 构】
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汕头大学医学院附属粤北人民医院心血管研究所
【基金项目】
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广东省自然基金资助项目(9151008901000039)
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目的建立茎环引物实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(fqRT-PCR)检测微小RNA(miRNA)的定量检测方法。方法选择300例心肌梗死患者作为心肌梗死组,心肌梗死组患者根据病情再分为急性组、亚急性组及慢性组;同期选取100例健康体检者作为对照组。采用茎环引物fqRT-PCR、金纳米-分子信标fqRT-PCR检测其血清miRNA-21表达水平。结果急性期、慢性期心肌梗死患者血清miRNA-21表达水平高于亚急性期和对照组(P<0.05),亚急性期患者的血清miRNA-21表达水平高于对照组(P<0.05)。茎环引物fqRT-PCR检测miRNA-21,最低检出102 copies/μL的稀释标本,而金纳米-分子信标fqRT-PCR最低检出105 copies/μL的稀释标本。茎环引物fqRT-PCR与金纳米-分子信标fqRT-PCR检测miRNA-21比较,节约464个引物,节省时间208min。结论茎环引物fqRT-PCR检测miRNA具有快速、灵敏、重复性好,可用于临床定量分析miRNA。
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