阿霉素-海藻酸钙纳米缓释微球对人肿瘤HeLa细胞的抑制作用及其机制

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mazd88
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目的 制备新型负载阿霉素(Adriamycin)的海藻酸钙(CA)纳米微球(NPs),探讨阿霉素-CA-NPs对人肿瘤HeLa细胞生长的影响及其分子机制.方法 采用离子交联方法,制备阿霉素-CA-NPs,检测其粒径和包封率,行体外释放实验,检测其缓释,并设置空白对照和CA-NPs组.细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测阿霉素和阿霉素-CA-NPs对HeLa细胞增殖的影响,流式细胞术检测HeLa细胞凋亡,Westren blot检测HeLa细胞中半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3蛋白的表达.结果 (1)制备的阿霉素-CA-NPs的粒径为(157.3±8.57) nm,其缓释12 h的累积缓释率近70%.(2) CCK-8法检测各组抑制HeLa细胞增殖作用的结果表显示:阿霉素和阿霉素-CA-NPs的半数抑制剂量(IC50)分别为192.75和89.63 μg/L,阿霉素-CA-NPs的IC50不到阿霉素IC50的1/2,阿霉素-CA-NPs的作用效果更显著(P<0.05).(3)流式细胞术检测结果显示,阿霉素组和阿霉素-CA-NPs组的细胞凋亡强度为(45.40±0.79)%和(60.67±1.03)%,与CA-NPs组比较差异有统计学意义(P<0.05),且阿霉素-CA-NPs组的凋亡强度较阿霉素更显著(P<0.05).(4)划痕实验结果显示:不同浓度的阿霉素-CA-NPs处理12h后HeLa细胞迁移能力显著降低,与空白组和CA-NPs组比较,其差异有统计学意义(P<0.05),且呈剂量依赖性.(5)Western blot检测结果显示:与空白对照组比较,阿霉素组与阿霉素-CA-NPs组Caspase-3蛋白表达量均有明显升高(0.67 ±0.13和0.88±0.16,P<0.05)],而阿霉素-CA-NPs处理组Caspase-3的表达量又显著高于阿霉素组(P<0.05).结论 具有缓释功能的阿霉素-CA-NPs,对HeLa细胞具有更加显著的抑制作用,其可能是通过促进Caspase-3蛋白的表达进而诱导肿瘤细胞凋亡来实现的.
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