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目的:筛选肿瘤细胞中的瓜氨酸化蛋白。方法培养食管癌、肝癌、卵巢癌、乳腺癌、肺癌、宫颈癌、结肠癌、肾癌、胰腺癌和胃癌细胞系,用2张相同凝胶在相同条件下对肿瘤细胞系中提取的蛋白进行二维电泳(2-DE)分析;将其中1张2-DE凝胶上的蛋白印迹转印至聚偏氟乙烯膜上,用抗瓜氨酸抗体杂交后检测免疫信号。将二维蛋白质印迹法(2-D WB)结果与另外1张2-DE蛋白图谱进行对比,将显示瓜氨酸免疫信号的蛋白从第2张2-DE凝胶中收集并进行质谱鉴定,以确定瓜氨酸蛋白。用免疫共沉淀法验证各肿瘤细胞系中瓜氨酸化蛋白的表达。结果2-DWB和质谱分析结果显示,培养的肿瘤细胞系中存在瓜氨酸化的α-烯醇化酶( ENO1)、热休克蛋白60( HSP60)、细胞角蛋白8(KRT8)、微管蛋白β(TUBB)、T细胞受体β链(TCRβ)、波形蛋白和蛋白质二硫化物异构酶。免疫共沉淀法分析结果显示,肿瘤细胞中有ENO1、HSP60、KRT8和TUBB的瓜氨酸化和表达。结论肿瘤细胞系中存在ENO1、HSP60、KRT8和TUBB被瓜氨酸化的现象。